期刊简介
本刊主要刊登有关国内外人体微生态学、动植物微生态学及分子水平的微生态学等各领域的基础研究、应用研究、发展动态、成果和技术方法，包括生态制品（人用、兽用、水产、环境等）的研究、正常微生物群与微环境的平衡关系以及微生态失调造成疾病的防治研究、实验室技术等，以及促进微生态学与生命科学各学科相关领域的学术交流。
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首页>中国微生态学杂志
- 杂志名称：中国微生态学杂志
- 主管单位：中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华预防医学会 大连医科大学
- 国际刊号：1005-376X
- 国内刊号：21-1326/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中华预防医学会优秀期刊期刊收录：万方收录(中), 文摘杂志, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, SA 科学文摘(英), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 哥白尼索引(波兰), 维普收录(中)
酵母双杂交系统筛选与RapGAP相互作用的蛋白质
苗小艳；孔繁斗；石敏；Bos JL；赵春艳
关键词：RapGAP, 酵母双杂交, 美丽线虫
摘要：目的 筛选与RapGAP相互作用的蛋白质,为进一步研究人源Rap1 GAP介导的信号转导通路、揭示其与肿瘤的关系提供实验依据.方法 选用与Rap1GAP同源的来自美丽线虫的RapGAP作为饵蛋白,以来源于美丽线虫的cDNA文库作为靶蛋白,应用pPC97、pPC86组成的酵母双杂交系统筛选cDNA文库中与RapGAP相互作用的蛋白质.结果 通过营养缺陷平板(-LTH)筛选出63个拟似阳性菌落.经过LacZ鉴定,19个菌落为阳性,其中7个为强阳性.提取来自19个酵母菌落中的重组DNA,经PCR扩增,12个菌落出现阳性结果.将该19个重组DNA分别电转化入DH5α细菌,涂板培养后,每板挑取4～ 10个克隆,通过SalⅠ和NotⅠ双酶切鉴定进行阳性克隆筛选.将阳性克隆的重组DNA进行序列测定.测序结果与GenBank比较,其中4个克隆的DNA片段为Y39b6a基因片段、2个为RapGAP、1个为苯丙氨酸4-羟化酶、1个为细胞色素C氧化酶,还有1个DNA片段编码美丽线虫特有的小分子蛋白的基因片段,其余11个DNA片段不编码已知蛋白质.结论 初步筛选出与RapGAP相互作用的蛋白质,特别是其中有2个克隆为RapGAP,提示RapGAP可能以二聚体的方式存在.
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