期刊简介
本刊主要刊登有关国内外人体微生态学、动植物微生态学及分子水平的微生态学等各领域的基础研究、应用研究、发展动态、成果和技术方法，包括生态制品（人用、兽用、水产、环境等）的研究、正常微生物群与微环境的平衡关系以及微生态失调造成疾病的防治研究、实验室技术等，以及促进微生态学与生命科学各学科相关领域的学术交流。
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首页>中国微生态学杂志
- 杂志名称：中国微生态学杂志
- 主管单位：中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华预防医学会 大连医科大学
- 国际刊号：1005-376X
- 国内刊号：21-1326/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中华预防医学会优秀期刊期刊收录：万方收录(中), 文摘杂志, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, SA 科学文摘(英), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 哥白尼索引(波兰), 维普收录(中)
靶向ADAM17基因RNA干扰慢病毒载体的构建及慢病毒包装
李亚清；严建平；许武林；王宏；任卓超；陈瑜
关键词：解整合素-金属蛋白酶17, RNA干扰, 慢病毒
摘要：目的 构建靶向ADAM17基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体及包装慢病毒.方法 根据人ADAM17mRNA序列设计4个靶序列,合成4对寡核苷酸序列,同时合成1对阴性对照寡核苷酸序列；将以上5对寡核苷酸序列退火后连入pLVTHM质粒,经酶切和测序鉴定.将重组慢病毒质粒转染至A549细胞,以Real-time PCR检测A549细胞中ADAM17 mRNA表达.将干扰效果佳的质粒载体和包装质粒共转染至293T细胞,包装产生病毒颗粒.以流式细胞术检测重组慢病毒的滴度.结果 酶切和测序证实干扰靶序列已被准确克隆到pLVTHM质粒载体.pLVTHM-ADAM17-siRNA1-4均可显著抑制A549细胞ADAM17 mRNA的表达,其中pLVTHM-ADAM17-siRNA4的抑制效果佳.LV-ADAM17-siRNA4重组慢病毒的滴度为2.16×108 TU/ml.结论 成功构建了靶向人ADAM17基因RNAi慢病毒载体及包装了重组慢病毒.
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