期刊简介
本刊主要刊登有关国内外人体微生态学、动植物微生态学及分子水平的微生态学等各领域的基础研究、应用研究、发展动态、成果和技术方法，包括生态制品（人用、兽用、水产、环境等）的研究、正常微生物群与微环境的平衡关系以及微生态失调造成疾病的防治研究、实验室技术等，以及促进微生态学与生命科学各学科相关领域的学术交流。
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首页>中国微生态学杂志
- 杂志名称：中国微生态学杂志
- 主管单位：中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华预防医学会 大连医科大学
- 国际刊号：1005-376X
- 国内刊号：21-1326/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中华预防医学会优秀期刊期刊收录：万方收录(中), 文摘杂志, Pж(AJ) 文摘杂志(俄), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, SA 科学文摘(英), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 哥白尼索引(波兰), 维普收录(中)
慢病毒介导的RNAi对大鼠SOCS3基因表达的抑制作用
张旭；刘正娟；吴鸣；滕懿群；骆秋龙；陈俊国；陆燕；章爱莲
关键词：细胞因子信号转导抑制因子3, 核糖核酸干扰, 慢病毒载体, 下丘脑细胞
摘要：目的 研究慢病毒表达载体介导的RNA干扰(RNAi)对大鼠下丘脑细胞中细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)的抑制作用.方法 根据大鼠SOCS3基因(NM053565),用Ambion在线软件选择3个靶序列,设计并合成包含各正反义靶序列的互补单链寡核苷酸,与经BamH Ⅰ和Xho Ⅰ酶切后的慢病毒载体质粒pRNA-lenti-GFP连接产生pRNA-Lenti-SOCS3 -GFP慢病毒重组质粒,与慢病毒包装混合物共转染293T细胞,包装产生慢病毒,收集病毒上清,采取逐孔稀释滴度法测定病毒滴度,然后转染大鼠下丘脑细胞,通过荧光显微镜观察细胞转染情况,利用荧光实时定量PCR方法检测RNAi组(siRNA1,siRNA2,siRNA3)、空白细胞组和阴性序列组(siRNA-Negtive)中SOCS3的表达情况.结果 将目的序列成功连接到载体上,并经测序分析证实载体构建成功.系列稀释法检测慢病毒悬液的滴度为1.0×1010 TU/L.荧光实时定量PCR检测显示慢病毒感染大鼠下丘脑细胞后,与空白细胞组相比,3个RNAi组都有不同程度的抑制SOCS3表达,其中siRNA1组的抑制效果好,可使SOCS3 mRNA表达下调达80％.结论 构建的pRNA-Lenti-SOCS3-GFP慢病毒载体可有效地抑制大鼠SOCS3的表达,为以SOCS3基因为靶点的相关疾病的基因治疗研究奠定基础.
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